產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4545 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
新疆出病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Xinjiang Hemorrhagic Fever Virus(XHFV=CCHFV)RTPCR | BKP4545 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:新疆出病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Cerebroside B 88642-46-0 中文名:腦苷酯B 分子式:C41H77NO9 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 誘導(dǎo)活性; 細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑; 子實(shí)體形成增強(qiáng)劑; ; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠內(nèi)皮脂肪酶elisa試劑盒 小鼠內(nèi)皮脂肪酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠內(nèi)皮脂肪酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮脂肪酶試劑盒、小鼠內(nèi)皮脂肪酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Ceftiofur 103980-44-5 中文名:頭孢噻呋鹽酸鹽 分子式:C19H18ClN5O7S3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血酶受體()ELISAKit ELISA. 96T/48T
Cefquinome 84957-30-2 中文名:頭孢喹咪 分子式:C23H24N6O5S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Cefozopran 113981-44-5 中文名:鹽酸頭孢唑蘭 分子式:C19H18ClN9O5S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Cefotaxime 64485-93-4 中文名:頭孢噻肟鈉 分子式:C16H17N5NaO7S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Betamethasone 378-44-9 中文名:倍他米松 分子式:C22H29FO5
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Boldenone acetate 中文名:寶丹酮醋酸酯 分子式:C21H28O3
小鼠P物質(zhì)(mouse Substance P) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ethyl 13-hydroxy-α-linolenate 中文名: 分子式:C20H34O3
小鼠P物質(zhì) 英文名稱: Substance P 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Substance P Benzyl L-(+)-mandelate 62173-99-3 中文名:L-(+)-扁桃酸芐酯 分子式:C15H14O3 度:98.0%
小鼠Pleioophin(mouse Pleioophin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Bendamustine 中文名:鹽酸苯達(dá)莫司汀 分子式:C16H22Cl3N3O2
新疆出病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷HBL-100細(xì)胞,人細(xì)胞 兔腎細(xì)胞系,RK-13細(xì)胞 細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-癸酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-10)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRN-Decanoyl-N-methylglucamine
SW1116(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRn-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside
HSaVEC Pellet 人隱內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化生長(zhǎng)添加物MADSD-綿子糖五水;蜜三糖五水質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD(+)-Raffinose pentahydrate
CL-0294MuM-2C(人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2D-泛酸鈣,維生素B5質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Calcium Panthotenate(Vitamin B5)
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 脫羧氯雷他定/地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格:>98%Desloratadine
DLD-1(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22,4-十九二炔酸(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)2,4-Nonadecadiynoic Acid
CA9 Others Human 人 CA9 / CAIX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 10,12-二十五二炔酸(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)10,12-Pentacosadiynoic Acid
人胃平滑肌細(xì)胞HGSMC2,4-十五二炔酸(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)2,4-Pentadecadiynoic Acid
IGFBP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 10,12-二十三聯(lián)炔酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)10,12-Tricosadiynoic Acid
大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1,5-萘二磺酸二鈉鹽(>97%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRNaphthalene-1,5-disulfonic acid di salt