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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4314
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-16
  • 更新日期: 2025-01-03
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4314
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書

Salmonella kentuckyPCR

BKP4314

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

4β-Hydroxywithanolide E  中文名:4β-羥基醉茄內(nèi)酯分子式:C28H38O8    植物二(MDA)測定試劑盒(比色法)

4-Oxododecanedioic acid  中文名:  分子式:C12H20O5    維生素EVitaminE)測定試劑盒(比色法)

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  中文名:  分子式:C18H24N4O18    超微量Na+K+ATP酶測定試劑盒                 

4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  中文名:  分子式:C8H8N2O4    氧化酶(XOD)測試盒   紫外分光光度法   50/48

4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  中文名:  分子式:C12H14N2O2    葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒   可見分光光度法   50/48
桿菌(YP)核酸檢測試劑盒   48T  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  156767-69-0  中文名:  分子式:C28H46O2 

噬中性及細(xì)胞活化肽 -2(NAP-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Testosterone isocaproate  中文名:異己酸睪酮  分子式:C25H38O3 

噬酸性粒細(xì)胞趨化因子 -2(Eotaxin-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  3090-70-8  中文名:3-乙?;?/span>-5α-雄烷二醇  分子式:C21H34O3  度:98.0%   

嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白   英文名稱:   eosinophil cationic protein   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   ECP  3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2  中文名:  分子式:C28H44O3  度:97.0%  關(guān)鍵詞:  靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子 (Eotaxin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 Biosource  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  88191-14-4  中文名:  分子式:C28H44O4  度:97.0%  關(guān)鍵詞:  靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
肯塔基沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書PDHA1 Others Human PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸柔紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Daunorubicin HCl

人少突膠質(zhì)細(xì)胞HO鹽酸柔紅霉素(進(jìn)口)質(zhì)量規(guī)格:USP,進(jìn)分sigmaD8809 Daunorubicin HCl

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人細(xì)胞,A-704細(xì)胞 AGS(胃腺癌細(xì)胞)達(dá)格列嗪;達(dá)格列凈質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,生化試劑級Dapagliflozin

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y甘草查而酮 A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品Licochalcone A

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三氯卡班質(zhì)量規(guī)格:>98.0%Triclocarban
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLSBES;2-溴乙基磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 2-bromoethanesulphonate

JB6-C41細(xì)胞,小鼠皮膚細(xì)胞 SHG44(細(xì)胞) 犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wildBICINE;N,N-二羥乙基甘氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%BICINE

EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)BES  salt; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>99%BES  Salt

LS 180(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1mlBES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%BES free acid

人上皮細(xì)胞HBEpiCBz-2'-脫氧胞苷亞1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格:>98%Bz-dC Phosphoramidite
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。


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