產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4131 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
綿羊病毒2型PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Ovine Herpesvirus 2(OHV2)2PCR | BKP4131 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:綿羊病毒2型PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol 129141-48-6 中文名: 分子式:C8H16O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Testosterone 1965/6/5 中文名:1-睪酮 分子式:C19H28O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-O-Methylnataloe-emodin 103392-51-4 中文名: 分子式:C16H12O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠固 英文名稱: Aldosterone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ALD
1-Naphthol 90-15-3 中文名: 分子式:C10H8O 度:96.0% 小鼠白蛋白 英文名稱: Albumin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ALB
1-Monopalmitin 542-44-9 中文名:1-棕櫚酸單甘油酯 分子式:C19H38O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠乙酰輔酶A羧化酶 英文名稱: Mouse Acetyl Coenzyme A Carboxylase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACC
L-Isoleucine 50g Vildagliptin 274901-16-5 中文名:維達(dá)列汀 分子式:C17H25N3O2
Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5 Vildagliptin 中文名:維達(dá)列汀 分子式:C17H25N3O2
Lectin,fromiticumvulgaris Trenbolone heptanoate N 中文名: 分子式:C25H34O3
Lectin,fromArachisHypogaea(pean) Trenbolone heptanoate 中文名: 分子式:C25H34O3
Kisser封片液 10ml Anthraquinone 中文名:蒽醌 分子式:C14H8O2 度:98.0%
綿羊病毒2型PCR檢測試劑盒供應(yīng)家貓肺細(xì)胞;FCA-L1 羊膜細(xì)胞,Ha Fe細(xì)胞 BaF3細(xì)胞,小鼠原B細(xì)胞株香蜂草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isosakuranetin 7-O-rutinoside
人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A鹽酸萘替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Naftifine Hydrochloride
PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 碳酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Calcium carbonate
原代神經(jīng)元細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml甲磺酸氨氯地平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Amlodipine mesylate
CD40LG Others Human 人 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 曲克蘆丁(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Troxerutin
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 對錄本酸,英文名或英文縮寫:PCBA,級別:BR,99%,規(guī)格:50毫克
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM](-)-二異蒎基錄硼完 (-)-Diisopinoccmphqyl chloroborcnq 82116-37-6
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-(+)-本甘安醋 L-Phqnylglycinq 932-32-2
人肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLxlonofonm:ISOAMYLALCOHOL24:1錄仿:異 24:1生物技術(shù)級950MLRT
P815細(xì)胞,小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞 V79-4(中國倉鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-CN-芴甲氧羰酰基-D-色酸NA
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。