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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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犬巨球菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3958
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3958
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

犬巨球菌PCR檢測試劑盒說明書

Macrococcus canisPCR

BKP3958

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:犬巨球菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
T-109A彈性蛋白酶(10mL酶解緩沖液)1mL無水錄化銅shēng huà shì jì容量:100毫克

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞 低轉(zhuǎn)移細胞,96-C細胞 PLC/PRF/5(亞力山大細胞) 2-Bromo-2-mqthylpropcnq 207-19-7

小鼠細胞;Fox-NY堿式,英文名或英文縮寫:Lead(II)acetate basic,級別:CP,98.5%,規(guī)格:5

PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性氧化鋁shēng huà shì jì容量:100毫克

大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r55486-55-526-二甲氧基2,6-Dimetxoxy
HMGB1 Others Human
HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 血紅素(>95%,BR)Hematin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1聚乙二醇800PEG 800質(zhì)量規(guī)格:BR

OPTN Others Human Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 炔雌;炔雌醇環(huán)戊Quinestrol質(zhì)量規(guī)格:USP

卵巢微內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)1酸二酯酶 (比活度:>20 U/mg,BC)Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mgBC

人臍平滑肌細胞 人胚肺細胞,NCI-H1563[H1563]細胞 MLTC-1(間質(zhì)細胞瘤細胞)化丙啶(>95% (HPLC),BC)Propidium iodide質(zhì)量規(guī)格:>95% (HPLC),BC
犬巨球菌PCR檢測試劑盒說明書HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 6α-羥基紫杉醇6α-Hydroxy Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格:美國進口

人惡性多發(fā)性;ERA-2α-腺苷α-Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

Spike Others Human coronavirus spike glycoprotein (aa 1-760) 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷 3-1酸鈉鹽Adenosine 3'-monophosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

FaDu 人咽鱗癌細胞腺苷 3',5'-1酸鈉鹽Adenosine 3',5'-diphosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

Caco-2人結(jié)直腸腺癌細胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS腺苷 2',5'-1酸鈉鹽Adenosine 2',5'-diphosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
腦動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)wo7iumBORATEBUFFER硼酸鈉緩沖液超級白色精細結(jié)晶粉末RTsigma

AIM2 Others Human AIM2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3-肖基本安(易制暴) 3-nitnocnilinq 1999-9-

小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20谷草轉(zhuǎn)酶測試盒10

293T/17[HEK 293T/17]細胞,人胚腎細胞 人膽管細胞型細胞,HCCC-9810細胞 CL-0160Molt-4(人急性母細胞細胞)5×106cells/瓶×2wo7iumACETATE,2MSOLUTION,pH4.2醋酸鈉溶液生物技術(shù)級透明無色液體RTsigma

倉鼠卵巢細胞;Lec1922-67-8metxyl propiolate


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