產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3971 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
異源曼氏桿菌PCR檢測試劑盒供應 | Mannheimia varigenaPCR | BKP3971 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CNDP1 Others Human 人 CNDP1 人細胞裂解液 (陽性對照) CarboxypeptidaseB精蛋白酶100克BR,99%
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6二十二烷酸 Behenic acid,99% 112-85-6 1G 通用試劑
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 蘇木色精;蘇 HqMctoxylin;(Z)-11-HDOL;xy7noxybrcsilin;Ncturcl blcck-1;C.I.75290 217-8-
T-111A木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mLN-Acetyl-L-Glutamine茶酸100微克BR,98%
HB細胞,人細胞 人臍內皮細胞,HUVEC(原代)細胞 大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-11707-03-5二本基1酸Dipxenylphosphinic acid
HEH 人胚胎組織來源細胞群勃龍醋酸酯 Revalor-H Trenbolone acetate質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
CM-R083大鼠滑膜細胞完全培養(yǎng)基100mL水飛薊賓(標準品)Silibinin質量規(guī)格:HPLC>97%,標準品
NCI-N87 [N87]人細胞水飛薊賓Silibinin質量規(guī)格:>97%,BR
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0928 人前脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL依澤替米貝;依折麥布Ezetimibe質量規(guī)格:>99%
小鼠星形膠質細胞MA依澤替米貝;依折麥布(標準品)Ezetimibe質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
異源曼氏桿菌PCR檢測試劑盒供應L W-3A 小鼠皮下結締組織細胞羥基波生坦Hydroxy Bosentan質量規(guī)格:美國進口
CM-H067人腎系膜細胞完全培養(yǎng)基100mLN-去甲基克拉霉素N-Desmethyl Clarithromycin質量規(guī)格:美國進口
B16-F10, 小鼠色素瘤高轉移細胞阿糖胞苷 5‘-單1酸鹽Cytarabine 5'-Monophosphate質量規(guī)格:美國進口
人卵巢;PA-1 人視網(wǎng)膜muller細胞完全培養(yǎng)基 100mL達卡巴嗪-d6Dacarbazine-d6質量規(guī)格:美國進口
人表皮色素細胞-淺色素cDNAHEM-l cDNA達沙替尼β-D-葡萄糖苷Dasatinib β-D-Glucuronide質量規(guī)格:美國進口
人真皮成纖維細胞-胎兒總RNAHDF-f NA絞股藍皂苷XLIX(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Gypenoside XLIX
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細胞裂解液 (陽性對照) YM-201636質量規(guī)格:>98%,PIKfyve抑制劑YM201636
人真皮微內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL金石蠶苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Poliumoside
VERO E6細胞,猴腎細胞系 Lec1(卵巢細胞) 小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929]金絲桃苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Hyperoside
EFNA5 Protein Canine 重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)6-甲氧基-2-萘乙酮(標準品)質量規(guī)格:TLC法檢查2-Acetyl-6-methoxynaphthalene
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:異源曼氏桿菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。