產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4099 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
諾如病毒3型PCR檢測試劑盒供應 | Norwalk Viruses G3(NV3)G3RTPCR | BKP4099 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NeuroFectagen? 神經細胞轉染試劑盒SUDANRED7B7B超級暗紅色粉末RTsigma
SERPINB6 Others Human 人 SerpinB6 / PI-6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 肖醋布康坐 Butoconczolq nitnctq 6487-77-1
人口腔表皮樣癌細胞;KB軟骨素 B Chondroitin sulfate B (from por... 54328-33-5 25MG 通用試劑
HeLa 229細胞,細胞 人低分化細胞,MKN-45細胞 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu蛋白酶S,英文名或英文縮寫:Protease S Aureus,級別:BR,4u/mg,規(guī)格:250克
tTA基因修飾的小鼠細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3(谷酰胺)
C127細胞,細胞 人細胞,9811C11細胞 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1西替利嗪Cetirizine 2HCl質量規(guī)格:>98%,進口分裝
大鼠源細胞醋酸西曲瑞克Cetrorelix Acetate質量規(guī)格:>98%,BR
KLK11 Others Human 人 KLK11 / Kallikrein-11 人細胞裂解液 (陽性對照) 白屈菜紅堿Chelerythrine質量規(guī)格:>98%,分析標準品
胎盤滋養(yǎng)層細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)醋酸氯己定Chlorhexidine Acatate質量規(guī)格:>98%
CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟伐他汀鈉Fluvastatin salt質量規(guī)格:>99%,BR
諾如病毒3型PCR檢測試劑盒供應Walker氏癌256瘤株;W256 細胞,U251細胞 WEHI 231細胞,小鼠B細胞TCPP[=四(4-羧苯基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))TCPP [=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin] 質量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
5637, 人細胞 Human偶氮甲堿H(>97.0%(T))Azomethine H 質量規(guī)格:>97.0%(T)
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-磺基水楊酸sulfosalicyclic acid質量規(guī)格:AR
角質細胞培養(yǎng)基(特定)KM-d1-氨基-2-萘酚-4-磺酸1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid 質量規(guī)格:AR
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 利卡西平;10,11-二氫-10-羥基卡馬西平10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine 質量規(guī)格:>98%,美國進口原裝
PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / appin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 固鹽shēng huà shì jì容量:2~8°C50毫克
人T細胞細胞;HuT 78姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP
人卵巢成纖維細胞(HOF) ( 5×105 )苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用試劑
CM-R048大鼠腸巨噬細胞完全培養(yǎng)基100mL二炎酸鹽shēng huà shì jì容量:100克
小鼠色素瘤細胞;B16 小鼠肝實質細胞完全培養(yǎng)基 100mLD-Fructose 250g/500g/1kg/5kg原裝 Amresco 0226
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:諾如病毒3型PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。