產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4046 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
山羊支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 山羊支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Mycoplasma capricolum subsp. CapripneumoniaePCR
【貨號】: BKP4046
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
山羊支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
人組織細胞瘤細胞;U937 [U-937]二正辛胺shēng huà shì jì容量:1公斤
CLEC7A Others Mouse 小鼠 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細胞裂解液 (陽性對照) N-本基-1,4-本二安 4-cminodiphqnylcminq 101-24-
大耳山羊皮膚細胞;LDG-3丁酰膽堿酯酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT1000支/盒
11. 細胞系統(tǒng)酵母蛋白胨培養(yǎng)基支RT
CL-0139Li-7(人細胞)5×106cells/瓶×2Uridine 5g/10g/50g原裝 Amresco 0975
CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸漿苦味素L(標(biāo)準(zhǔn)品)Physalin L質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用
CM-R114大鼠視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL1-甲基海因(標(biāo)準(zhǔn)品)1-METHYLHYDANTOIN質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用
KYSE70細胞,人食管鱗癌 神經(jīng)細胞,SHG-44細胞 豬腎傳代細胞;IBRS-2古倫賓(標(biāo)準(zhǔn)品)Columbin質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用
CFPAC-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2安五脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)Anwuligan質(zhì)量規(guī)格:鑒別
TNFSF8 Others Human 人 CD30 Ligand / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 絡(luò)石苷(標(biāo)準(zhǔn)品)tracheloside質(zhì)量規(guī)格:含量測定
IGFBP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP3 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-精氨酸DL-Arginine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肝實質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-鼠李糖(標(biāo)準(zhǔn)品)L(+)-Rhamnose monohydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MOLT-4細胞,人急性T母細胞細胞 大鼠細胞株,NUTU-19細胞 人外根殼細胞cDNAHHORSC cDNAL-鼠李糖;鼠李糖一水L(+)-Rhamnose monohydrate質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
NCTC 1469(小鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2鼠尾草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Carnosol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
COLO 205(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝細胞;BRL鼠尾草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Carnosic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
山羊支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒說明書Promocell C-25110 Hepatocyte Growth MediumKIT, 肝細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)9,9'-Spirobi[9H-fluorene]
人心肌細胞-心房總RNAHCF-aa NA2-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)2-Aminoanthracene
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)1-Aminoanthracene
人大隱內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL9-溴蒽(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)9-Bromoanthracene
Ana-1細胞,小鼠巨噬細胞 WEHI 22.1(B細胞) 小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH22'-脫氧鳥苷-13C,15N2質(zhì)量規(guī)格:美國進口2'-Deoxyguanosine-13C,15N2
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。