產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4013 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)PCR
【貨號】: BKP4013
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細胞) 5×106cells/瓶×2AIBME偶氮二異二5克BR,90%
HL-60(人早幼粒急性細胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞;HK-2肖醋銅 Coppqr(II)nitnctq Gqrhcrditq;Cupric nitnctq trihydrctq 321-3-8
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY1036wo7iumdodecanoate十二酸鈉1克超,99%
人成纖維細胞 (HLF)( 5×105 )2-Deoxy-L-ribose2-脫氧-L-核糖2×1毫升BR
CL-0423RIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×26-CarboxyfluoresceinDiacetate 10mg/25mg/100mg原裝 Sigma C-5041
EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲洛司坦(標準品)Trilostane質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
小鼠樹突狀細胞低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP醋酸曲普瑞林Triptorelin Acetate質(zhì)量規(guī)格:度大于98%
HPAEpiC細胞,人肺泡上皮細胞 小鼠腎小球系膜細胞,MES-13細胞 CL-0090Hacat(人永生化角質(zhì)形成細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸萬古霉素Vancomycin HCl質(zhì)量規(guī)格:≥900μg/mg,USP33,BR
T-24(人細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸萬古霉素(標準品)Vancomycin HCl質(zhì)量規(guī)格:含量測定
HPMEC-c 人肺微內(nèi)皮細胞(HPMEC) 500,000cells 腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)凡德他尼Vandetanib 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細胞培養(yǎng)
青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒直銷MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 山楂酸,馬斯里酸Maslinic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人肺大動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-并咪唑-5-磺酸,紫外線吸收劑 UV-T2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%
SK37細胞,人色素瘤細胞 出血性大腸埃希氏菌 人上皮細胞;Ca Ski3,4-二甲氧基肉桂酸(標準品)3,4-Dimethoxycinnamic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
ANGPTL7 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標簽)頭孢地嗪鈉Cefodizime 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
K-562(人細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 COLEC10 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢地尼Cefdinir質(zhì)量規(guī)格:>92%,BR
人Wilms細胞;G401Aluminum鋁絲50毫克AR,99%
TNFSF4 Others Cynomolgus 食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 人細胞裂解液 (陽性對照) 均本四加醋 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic ccid 1989-2-4
CL-0441SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2米力農(nóng) Milrinonq 78412-7-
HLF細胞,胚肺細胞 人上皮細胞,RWPE1細胞 人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-23-nitnoaniline3-硝基本胺25毫克高,75%
獼猴肺細胞;MML2GN增菌培養(yǎng)基Gram Negative Enrichment Medium
PCR檢測試劑盒:
青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。