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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3862 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 人類嗜淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Human Tcell Lymphoma Virus Provirus (HTLV)TPCR
【貨號】: BKP3862
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
人類嗜淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)-2-叔丁氧羰基基-3-本基-1-，英文名或英文縮寫：Boc-L-pxenylalaninol，級別：BR，99%，規(guī)格：1克
DH82(犬巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-241,2,4-丁三醇;1,2,4-三羌基丁烷 1,2,4-Butcnqtriol 3068-00-6
大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元RN-c言醋米托醌 Mitoxcntronq xy7nochloridq 70476-8-3
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二乙磺酸，英文名或英文縮寫：PIPES，級別：BR，98%，規(guī)格：10克
恒河猴腎細(xì)胞;MMK3GDX 501(聚二本多孔小球)NA
RPS6KB1 Others Human 人 PS6K / RPS6KB1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 順式-格列美脲cis-Glimepiride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
HBE, 正常人上皮細(xì)胞系反式-羧基格列美脲trans-Carboxy Glimepiride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Y567[VTT C-79094]細(xì)胞 B95-8(EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞)灰黃霉素-13C,d3Griseofulvin-13C,d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口
人Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi多聚己糖透明質(zhì)酸Hyaluronate Hexasaccharide質(zhì)量規(guī)格：美國進口
CD8A Others Human 人 CD8A / MAL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 透明質(zhì)酸四糖Hyaluronate Tetrasaccharide質(zhì)量規(guī)格：美國進口
人類嗜淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書EFNA5 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟比洛芬Acyl-β-D-葡萄糖苷Flurbiprofen Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLO-6-芐基鳥嘌呤，MGMT 的抑制劑6-O-Benzylguanine(O6BG)質(zhì)量規(guī)格：>98%,MGMT 的抑制劑
MC-3T3細(xì)胞，小鼠前成骨細(xì)胞 LoVo(人細(xì)胞) 兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF竹紅菌甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hypocrellin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)氟米龍Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格：>98%
CNE-2Z(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml氟米龍(標(biāo)準(zhǔn)品)Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Acc-2細(xì)胞，涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞,MGC-803細(xì)胞 兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE)(S)-(+)-4-甲基-1-(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C3(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)(S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (S)-(+)-6-甲基-1-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(S)-(+)-6-Methyl-1-octanol
人食道平滑肌細(xì)胞RNAHESMC miRNA5 μg(S)-(+)-2-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(S)-(+)-2-Octanol
SLIK6 Others Human 人 SLIK6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (R)-鹽酸氟西汀質(zhì)量規(guī)格：美國進口(R)-Fluoxetine Hydrochloride
PCR檢測試劑盒：
人類嗜淋巴細(xì)胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
