產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3802 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產品名稱】: 猿病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Herpesvirus Simiae(HVS)PCR
【貨號】: BKP3802
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
猿病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
人腎近端小管上皮細胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小膠質細胞 MouseL-脯酸芐酯鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:H-Pro-OBzloHCl,級別:特,98.0%,規(guī)格:25克
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-二棕櫚酰鱗脂酰膽減 1,2-DIHqXcDqCcNOYL-RcC-GLYCqRO-3-PHOSPHOCHOLINq 797-68-4
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 醇安 MonoqthcnolcMinq;qthylolcMinq;2-cMinoqthcnol;β-cMinoqthyl clcohol;ColcMinq 141-43-2
A498 對叔丁基鄰本二酚,英文名或英文縮寫:TBC,級別:BS,規(guī)格:500毫克
F98-RFP-puro(慢病毒構建穩(wěn)定株)大鼠腦細胞 F98-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinD-葡萄糖-1-1酸二鈉鹽(-20℃) 98-99%NA
大鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸奧昔布寧Oxybutynin HCl質量規(guī)格:Purity>99.0%;毒蕈堿型乙酰膽堿受體拮抗劑
Daudi人Butt's瘤細胞 Daudi human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸奧昔布寧(標準品)Oxybutynin HCl質量規(guī)格:>98%,標準品
IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標簽)鹽酸帕羅西汀Paroxetine HCl質量規(guī)格:>98%,半水合物
FO(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠腹脊髓神經元RN-vsc鹽酸帕羅西汀(標準品)Paroxetine HCl質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
胰島β細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)吡羅昔康Piroxicam質量規(guī)格:>97%,USP grade
猿病毒PCR檢測試劑盒說明書人腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R泰諾福韋;替諾福韋(標準品)Tenofovir質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
HO-8910PM細胞,高轉移細胞 人胃粘膜細胞,GES-1細胞 狗肺成纖維樣細胞;DogL1阿那曲唑Anastrozole質量規(guī)格:度> 99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1F3阿那曲唑(標準品)Anastrozole質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸安普霉素,硫酸阿布拉霉素Apramycin sulfate質量規(guī)格:>500U/mg,BR
人肺動脈成纖維細胞HPAF硫酸安普霉素(標準品)Apramycin sulfate質量規(guī)格:含量測定
AARS Others Mouse 小鼠 AARS / alanyl-NA syhetase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硅酸鈉1克
倉鼠卵巢細胞;Lec1姆沙伯 101 Chromosorb 101
BEL-7405細胞,細胞 細胞,BI U-87細胞 615小鼠樹突狀細胞瘤株;DCS聚乙二醇 3350 Poly(ethylene glycol) 3,350 (PEG 3350) 25322-68-3 100G 通用試劑
小鼠肺腺癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);LA1-GFPLM-137瓊脂500克
CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) (D-基葡萄糖)
PCR檢測試劑盒:
猿病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。