產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3516 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
破梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Clostridium tetaniPCR | BKP3516 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:破梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
土壤酸性0酸酶(S-ACP)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣 4-Aminoantipyrine 1983/7/8 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O
土壤漆酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣 4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S
土壤脲酶(UE)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3,5-dichloropyridine 中文名: 分子式:C5H4Cl2N2 度:98.0%
土壤酶(S-CAT)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 2374-03-0 中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3
土壤堿性蛋白酶 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3,5-dichloropyridine 22889-78-7 中文名: 分子式:C5H4Cl2N2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
Polypodine B 20,22-acetonide 中文名:20,22-異丙叉基水龍骨甾酮B 分子式:C30H48O8 度:97.5% 兔血小板活化因子(rabbit PAF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Desglucohellebrin 中文名: 分子式:C30H42O10 度:98.0% 兔P-選擇素(rabbit P-selectin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Polypodine B 中文名:水龍骨甾酮B 分子式:C27H44O8 度:97.5% 兔血小板衍化生長(zhǎng)因子(rabbit PDGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide 中文名: 分子式:C30H44O10 度:98.0% 兔趨化因子(rabbit Raes) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Withanolide S 中文名:醉茄內(nèi)酯S 分子式:C28H40O8 度:98.0% 兔素B2(TXB2)ELISA試劑盒
破梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格雄烯二酮 4-Androstene-3,17-dione 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR Pla25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒植物25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雄烯二酮(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Androstene-3,17-dione 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99% 小鼠極(VLDL)ELISA試劑盒 ,英文名: VLDL ELISA Kit
赤芝酸A Lucidenic acid A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97% 大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測(cè)試劑盒Rat5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 96T/48T
維生素E琥珀酸酯;D-α-生育酚琥珀酸酯 Vitamin E succinate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8(FGF8)試劑盒 Human FGF8 ELISA Kit
伊沙匹隆 Ixabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR RatStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-甲基胞嘧啶 5-methylcytosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR IP3R受體蛋白共沉淀分析試劑盒5
7-乙基喜樹(shù)堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 7-Ethylcamptothecin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Placalmodulin,CAMELISA試劑盒植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
7-乙基喜樹(shù)堿 7-Ethylcamptothecin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠激肽原1(KNG1)ELISA試劑盒 ,英文名: KNG1 ELISA Kit
(-)-Blebbistatin (-)-Blebbistatin 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人橙(AO)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAcrineOrange,AOELISAKit 96T/48T
奈達(dá)鉑;順糖氨鉑 Nedaplatin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)試劑盒 Rat Cardiac oponin T,cTn-T ELISA kit
丁香酸 HPLC≥99% 20mg ChickenLeinizingHormone,LHELISA試劑盒雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁香油 HPLC≥98% 20mg ChickenMyoglobin,MYO/MBELISA試劑盒雞肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁酸東莨菪堿 HPLC≥98% 20mg ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISA試劑盒雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
東莨菪苷 HPLC≥98% 20mg Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
東莨菪堿 HPLC≥98% 20mg ChickenParathyroidhormone,PTHELISA試劑盒雞甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
東莨菪內(nèi)酯 HPLC≥99% 20mg Chickenprolactin,PRLELISA試劑盒雞催乳素(PRL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
冬凌草甲素 HPLC≥98% 20mg ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA試劑盒雞可溶性?xún)?nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
冬凌草乙素 HPLC≥98% 10mg Chickenverylowdensitylipoprotein,VLDLELISA試劑盒雞極(VLDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
冬綠苷 HPLC≥98% 20mg Chickenα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豆腐果苷 HPLC≥98% 20mg Chickenβ-lactamaseELISA試劑盒雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。