產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3238 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
溫和氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Aeromonas sobriaPCR | BKP3238 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Stavudine 中文名:司他夫定 分子式:C10H12N2O4 植物RNA提取試劑盒(溶液法) 24ml
Stauntosaponin A 中文名: 分子式:C28H38O7 PlanNAplus 40ml
Stanozolol 中文名:康力龍 分子式:C21H32N2O 質(zhì)粒大量提取試劑盒 5T
Stanolone 中文名:雄諾龍 分子式:C19H30O2 PlasmidMaxiKit 10T
Sprengerinin C 中文名: 分子式:C44H70O16 植物草酸氧化酶(OxO)ELISA試劑盒
Periplocogenin 112899-63-5 中文名: 分子式:C28H42O6 Humanai-PL7-aibodyELISAKit 人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Wallicoside 88797-59-5 中文名:斷節(jié)參苷 分子式:C61H98O26 HumanelonginA,EloAELISA試劑盒人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Periplocoside N 39946-41-3 中文名: 分子式:C27H44O6 組織PIM1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Trillin 14144-06-0 中文名:延齡草苷 分子式:C33H52O8 humanPepsinogenC,PG-CELISAKit人胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
rsodeoxycholic acid 128-13-2 中文名:熊去氧膽酸 分子式:C24H40O4 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溫和氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書1--4-正辛基苯(>99.0%(GC)(T)) trans-4-Butylcyclohexanecarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T) ELISAKitDHEA-S人脫氫表雄同酯規(guī)格:48T/96T
1--4-壬基苯(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-nonylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 ,英文名: Aβ1-42 ELISA Kit
1--4-戊苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-pentylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmicrotubule-associatedprotein2,MAP-2ELISAKit 96T/48T
1--4-己苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-hexylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)試劑盒 Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
1--4-庚苯(含穩(wěn)定劑銅屑)(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-heptylbenzene (stabilized with Copper chip) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 英文名稱RatT4ELISAKit大鼠甲狀腺素(T4)規(guī)格:96T/48T
1--4-正辛基苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-n-octylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 酵母多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
1--4-癸基苯(>88.0%(GC)) 1-Bromo-4-decylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>88.0%(GC) ELISAKitMT人褪黑素規(guī)格:48T/96T
1--4-十二烷基苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-dodecylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 小鼠淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 ,英文名: Aβ1-40 ELISA Kit
1--4-十二烷基苯(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-dodecylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 人套膜蛋白(iNV)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanInvolucrin,iNVELISAKit 96T/48T
1--4-丁基苯(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-butylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)試劑盒 Rat prothrombin fragme 1+2,F1+2 ELISA Kit
Celite硅藻土,酸洗(用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A) Celite, acid-washed 質(zhì)量規(guī)格:用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A 犬骨堿性0酸酶(BALP)試劑盒 Canine bone Alkaline Phosphatase,BALP ELISA Kit
Celite® 硅藻土545(助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined)) Celite® 545 質(zhì)量規(guī)格:助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined) 犬骨橋素(OPN)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineOsteopoin,OPNELISAKit 96T/48T
氯己定(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlorhexidine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 犬骨橋素(OPN)試劑盒 Canine Osteopoin ELISA Kit
香茅醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)) β-Citronellol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC) 犬骨形成蛋白-1(BMP-1)試劑盒 Canine bone morphogenetic protein 1,BMP-1 ELISA Kit
多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%) Carbendazim solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3% 犬固酮(ALD)試劑盒 Canine aldosterone,ALD ELISA Kit
多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%) Carbendazim solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3% 犬胱天蛋白酶12(Casp-12)試劑盒 Canine Caspase 12,Casp-12 ELISA Kit
屈(標(biāo)準(zhǔn)品) Chrysene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬紅細(xì)胞生成素(EPO)試劑盒 Dog Erythropoietin,EPO ELISA Kit
西維因(標(biāo)準(zhǔn)品) Carbaryl 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(HPLC) 犬環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒 Canine cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
毒死蜱(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlorpyrifos 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 犬環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒 Canine cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%) Cyromazin solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2% 犬環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒 Dog cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA kit
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:溫和氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。