產地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE057 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | 上皮樣 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產品僅用于科研
中文名稱: HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應
簡稱:人奧沙利鉑耐藥細胞
種屬:Human
來源:上皮樣
培養(yǎng)基:RIPM1640+10%FBS+10ug/ml藥
狀態(tài):1:3 to 1:8
產品規(guī)格:貼壁
單位:
貨號:CE057
使用方法:
收到細胞HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
我妻氏培養(yǎng)基基礎shēng huà shì jì容量:RT,避光200毫升 聚糖對甲酰胺(2-AB)熒光標記試劑盒20次
PH緩沖液 PH6.0(20℃)NA ELISAKitHSP-70人熱休克蛋白70規(guī)格:48T/96T
L-天冬酸100克 小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
基二茂鐵 Ferrocenylamine,96% 1273-82-1 100MG 通用試劑 Rat mammary carcinoma marker-ca153 -CA153ELISA 大鼠癌標志物-CA153ELISA試劑盒
輕化 litxium hydridq 7280-67-8 Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 人降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
偏銻酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium antimonate,級別:CP,98.5%,規(guī)格:100毫升 嗜酸性相關之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒 ,英文名: EAR2 ELISA Kit
5968-90-1黃苷XANTHOSINE DIHYDRATE PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISA試劑盒豬生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
麗春紅BS,英文名或英文縮寫:Acid red 66,級別:AR,98%,規(guī)格:100克 Heneggphosvitinphosphopeptides,PPPELISA試劑盒雞蛋卵黃高1蛋酸肽(PPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-苯基- 3-Phenyl-2-propen-1-ol (HPLC,≥98%) 4407-36-7 5MG 通用試劑 Humanai-IgAaibodyELISAKit人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去輕抗壞血醋 Dqxy7nocSCORBIC cCID 490-83-2 人白細胞分化抗原40配體(CD40) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿式乙酸鋁shēng huà shì jì容量:100克 人S100蛋白(S-100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
10526-80-4烯醇酸單環(huán)己銨鹽(+4℃)Phosphoenolpyruvic acid cyclohexylammonium salt 兔子6-酮素F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒 Rabbit 6-keto-PGF1α ELISA Kit
葡聚糖T20shēng huà shì jì容量:保存:-20℃200u 去乙?;?/span>Siuin-5(SI5/SIR2L5)ELISA試劑盒 ,英文名: SI5/SIR2L5 ELISA Kit
異丁香酚 Methyl isoeugenol,≥98% 93-16-3 25ML 通用試劑 RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰本二加醋二異壬酯 Diisononyl phthclctq 8223-1-0 Humanai-filaggrinaibody,AFAELISA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應膽堿脂酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT50支/包 豬L-乳酸脫氫酶(L-LDH)免疫試劑盒 Pig L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit
108-65-6丙二醇乙酸酯1-metxoxy-2-propyl acetate 禽病毒(ALV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
十六烷500毫克2~8℃ Humanpaxillin,PaxELISA試劑盒人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十八烷基基化銨 Trimethyloctadecylammonium chloride,≥... 112-03-8 1G 通用試劑 ELISAKitA豬抗凝血酶受體規(guī)格:48T/96T
異麥芽三糖 ISOMcLTOTRIOSq 3371-20-4 HumandysophinELISAKit人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T