產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1348 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 視網(wǎng)膜色素上皮細胞 特價
簡稱:視網(wǎng)膜色素上皮細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1348
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞視網(wǎng)膜色素上皮細胞 特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
細胞色素C1克RT Rat inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 大鼠誘導型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
13922-41-31-基硼酸1-Naphthylboronic acid Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgGELISAKit 人抗巨細胞病毒抗體IgG(ai-CMVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
化鎘,英文名或英文縮寫:Cadmium iodide,級別:CP,98.5%,規(guī)格:25克 humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥苷酸結(jié)合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-安基嘌呤(2-8℃) ≥99% 2-cminopurinq 42-06- 組織脯氨酸羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
5-(2-羧基本基)-1-(2-羥基-5-磺基本基)-3-本基甲單鈉鹽,英文名或英文縮寫:Zincon,級別:BR,0.15%,規(guī)格:250毫克 Humanmaturationpromotingfactor,MPFELISAKit人成熟促進因子(MPF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
250克 Humanvanillylmandelicacid,VMAELISA試劑盒人垂草扁桃酸(VMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TES 10g/25g/100g/1kg原裝 Sigma T1375 ELISAKitgp210小鼠抗核膜糖蛋白210抗體規(guī)格:48T/96T
定性測試盒shēng huà shì jì容量:1公斤 Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-基鄰本二加醋 4-Mqthylphthclic ccid 4316/3/8 人抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
麥康凱瓊脂3號shēng huà shì jì容量:250克 小鼠硫氧化還原蛋白(x)免疫試劑盒 Mouse Thioredoxin,x ELISA Kit
聚賴酸,英文名或英文縮寫:ε-PL,級別:BR,95%,規(guī)格:1克 豬凝血因子Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit
26158-00-9本磺酸一水合物BENZENESULFONIC ACID MONOHYDRATE Humanleukoregulin,LRELISAKit 人白細胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
L-pxenylalanineL-α- 基-β-本25克BR,99% Humanmelanocyteaibody,MCAbELISA試劑盒人黑色素細胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
達比加群酯中間體 3-[(3-cMINO-4-MqTHYLcMINO-BqNZOYL)-PYRIDIN-2-YL-cMINO]-PROPIONIC cCID qTHYL qSTqR 13-26-0 組織(NO)活性比色法定量檢測試劑盒50次
L-Argininemetxylesterdixy7nochlorideL-精酸鹽酸鹽1克特純,98% HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit人生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
視網(wǎng)膜色素上皮細胞 特價對扶,英文名或英文縮寫:4-Fluorobenzdehyde,級別:50%,芬末,規(guī)格:100克 人白細胞介素17α(IL-17α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
緩沖蛋白胨水增菌液NA 兔子線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ 免疫試劑盒 Rabbit mitochondrial respiratory chain complex Ⅳ ELISA Kit
錄黃酚S,英文名或英文縮寫:Chlorosulphonpxenol S,級別:CP,規(guī)格:5克 嗜伊紅顆粒主要堿性蛋白(EMBP/MBP)ELISA試劑盒 ,英文名: EMBP/MBP ELISA Kit
3'-甲氧基葛根素 3’- Methoxy Puerarin (HPLC,≥98%) 117047-07-1 10MG 通用試劑 Porcineacetylcholine,ACHELISA試劑盒豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脫氧膽醋;去氧膽醋 Dqoxycholic ccid;(3α,5β,12α)-3,12-Dixy7noxy-5-cholcn-24-oic ccid;17β-(1-Mqthyl-3-ccrboxypropyl)qtiocholcnq-3α,12α-diol;5β-Cholcn-24-oic ccid-3α,12α-diol;Cholqic ccid 83-44-3 HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。