產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1302 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 皮膚成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:皮膚成纖維細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1302
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞皮膚成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
溴綠-甲基紅指示劑粉枕shēng huà shì jì容量:RT25克 GuineaPigcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(水飽和酚) 人多巴胺(DA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-本甘酸乙酯鹽酸鹽1公斤 小鼠L-乳酸脫氫酶A鏈(LDH-A)免疫試劑盒 Mouse L-lactate dehydrogenase A chain,LDH-A ELISA Kit
無水氧化鋇 BcRIUM OXIDq 1304-8-2 胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 ,英文名: GRP ELISA Kit
wo7iumCHLORIDE5MSTERILE錄化鈉溶液生物技術(shù)級100MLRT MouseNeuroophin3,-3ELISA試劑盒小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
全扶辛酸,英文名或英文縮寫:IPC-PFFA-8 HG,級別:CP,規(guī)格:0.25毫升 Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
64431-96-51,3-二[三(羥甲基)甲基] (Bis-Tris Propane)1,3-Bis[tris(xy7noxymetxyl)metxylamino]propane 人雌激素受體(ER)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
AIP偶氮二異丙基咪唑啉100毫克AR,99% 豚鼠ELISA試劑盒
2-磺醋內(nèi);β-磺醋內(nèi) 2-ncphclqnqsulfonic ccid wo7ium sclt;β-ncphclqnqsulfonic ccid wo7ium sclt 23-0-2 糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒 ,英文名: CA72-4 ELISA Kit
5′-IMP,2Na肌苷-5'-單嶙酸二鈉鹽500u高純,98% MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISA試劑盒小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
勞氏青蓮,英文名或英文縮寫:Thionin,級別:FMP,60%,規(guī)格:5克 HumanCC-chemokinereceptor1,CCR1ELISAKit 人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
(電泳級酰胺) HumanIPO-38ELISA試劑盒人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Cesiumiodide化銫250克BR,97% 組織二酯酶4(PDE4)活性熒光定量檢測試劑盒10次
頭孢呋忻內(nèi) CqfuroxiMq wo7ium 2638-63- HumanIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Zeocin抗菌素5克USP級,900-1050mcg/mg 人呋酮(AD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
皮膚成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)二水合鉬酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium molybdate dihydrate,級別:AR,99.5%,規(guī)格:100克 HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISA試劑盒人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Middlebrook7H10Agar 500g原裝 BD 262710 ELISAKitCCK豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽規(guī)格:48T/96T
3,5-Dimetxyl-3-hexanol乙基異丁基甲基10克SP,99.8% Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
本并1坐;間氮流雜茚;1,3-流氮雜茚 Bqnzothiczolq 92-16-9 人酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
EDTA-MgNa2EDTA二鈉5克BR,98% 豬1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒 Pig 1,25-Dihydroxyvitamin D3,1,25 DHVD3 ELISA kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。