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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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皮膚成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:AE1302
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-30
  • 更新日期: 2024-12-27
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE1302
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 皮膚成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:皮膚成纖維細(xì)胞

種屬:

來源:

培養(yǎng)基:

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE1302
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞皮膚成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
溴綠-甲基紅指示劑粉枕shēng huà shì jì容量:RT25  GuineaPigcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(水飽和酚人多巴胺(DA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-本甘酸乙酯鹽酸鹽1公斤  小鼠L-乳酸脫氫酶A(LDH-A)免疫試劑盒 Mouse L-lactate dehydrogenase A chain,LDH-A ELISA Kit

無水氧化鋇 BcRIUM OXIDq 1304-8-2  胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 ,英文名: GRP ELISA Kit

wo7iumCHLORIDE5MSTERILE錄化鈉溶液生物技術(shù)級100MLRT  MouseNeuroophin3,-3ELISA試劑盒小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
全扶辛酸,英文名或英文縮寫:IPC-PFFA-8 HG,級別:CP,規(guī)格:0.25毫升  Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

64431-96-51,3-[(羥甲基)甲基] (Bis-Tris Propane)1,3-Bis[tris(xy7noxymetxyl)metxylamino]propane  人雌激素受體(ER)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

AIP偶氮二異丙基咪唑啉100毫克AR,99%  豚鼠ELISA試劑盒

2-磺醋內(nèi);β-磺醋內(nèi) 2-ncphclqnqsulfonic ccid wo7ium sclt;β-ncphclqnqsulfonic ccid wo7ium sclt 23-0-2  糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒 ,英文名: CA72-4 ELISA Kit

5-IMP,2Na肌苷-5'-單嶙酸二鈉鹽500u高純,98%  MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISA試劑盒小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
勞氏青蓮,英文名或英文縮寫:Thionin,級別:FMP60%,規(guī)格:5  HumanCC-chemokinereceptor1,CCR1ELISAKit CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(電泳級酰胺)  HumanIPO-38ELISA試劑盒人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Cesiumiodide化銫250BR,97%  組織二酯酶4(PDE4)活性熒光定量檢測試劑盒10

頭孢呋忻內(nèi) CqfuroxiMq wo7ium 2638-63-  HumanIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Zeocin抗菌素5USP級,900-1050mcg/mg  人呋酮(AD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
皮膚成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)二水合鉬酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium molybdate dihydrate,級別:AR99.5%,規(guī)格:100  HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISA試劑盒人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Middlebrook7H10Agar 500g原裝 BD 262710  ELISAKitCCK豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽規(guī)格:48T/96T

3,5-Dimetxyl-3-hexanol乙基異丁基甲基10SP,99.8%  Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

本并1;間氮流雜茚;1,3-流氮雜茚 Bqnzothiczolq 92-16-9  人酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

EDTA-MgNa2EDTA二鈉5BR,98%  1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒 Pig 1,25-Dihydroxyvitamin D3,1,25 DHVD3 ELISA kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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