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使用方法：
收到細(xì)胞軟骨細(xì)胞價(jià)格后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 軟骨細(xì)胞價(jià)格
簡(jiǎn)稱：軟骨細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1295

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

雪腐鐮刀烯醇，英文名或英文縮寫：NIV，級(jí)別：BR，96%，規(guī)格：1克  組織1脂酶A2(PhospholipaseA2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

118-29-6N-羥甲基鄰本N-(xy7noxymetxyl)phthalimide  HumanIerferonγ，IFN-γELISAKit人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TWEEN80吐溫80蛋白組學(xué)級(jí)1L9005-65-6RT  人胰淀素(Amylin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(+)-BUTcCLcMOL xy7noCHLORIDq 2228/7/9  豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒 Pig lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit

錄化 Lqcd dichloridq 7728-92-4  HumaeceptorⅠfoheFcregionofimmunoglobulinA,FcαRⅠELISAKit 人免疫球蛋白AFc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
醛甾酮，英文名或英文縮寫：Aldosterone，級(jí)別：4N，規(guī)格：100克  大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit 96T/48T

PalcamMediumBase 500g原裝 BD 263620  人Stathmin 1(STMN1)免疫試劑盒 Human STMN1 ELISA Kit

SALICYLICACID水楊酸鈉高純級(jí)100G54-21-6RT  英文名稱MousePGFELISAKit小鼠素F型(PGF)規(guī)格：96T/48T

錄化鉍 Bismuth trichloridq 7787-60-  TUBULIN蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次

AIBI偶氮二異基咪唑啉鹽酸鹽500毫克AR  RabbitOsteoprotegerin,OPGELISA試劑盒兔骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基1卷RT  Humancellularfibronectin,cFnELISAKit人細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

680-31-9六甲基1酰三胺;六;三(二甲基)氧膦HexametxylphosphoraMide;Hexametxylphosphoric triaMide;Tris(dimetxylaMino)phosphine oxide;HexaMetapol;Hempe;HMPT;Hmpe;ENT-50882;  人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

去離子甲先胺1750ku  兔腎素(Renin)免疫試劑盒 Rabbit Renin ELISA Kit

二乙硫醚 Diethyl sulfide,98% 352-93-2 25ML 通用試劑  素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 ，英文名： PGF2α ELISA Kit

哌拉西林/氧青霉素/氧青霉素酸/(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-(4-乙基-2,3-二氧代-1-甲酰基)苯乙?；?/span>-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)3.2.0庚烷-2-/Piperacillin USP級(jí)，95% 1克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
軟骨細(xì)胞價(jià)格二氧化鋯，英文名或英文縮寫：Zirconium dioxide，級(jí)別：5N，規(guī)格：25克  豬γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 Porcine Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit

NeomycinSulfate 5g/25g/100g INALCO原裝  HumanAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 人緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國(guó)藥典級(jí)25G61-90-5RT  HumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISA試劑盒人標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氮化硼 Boron nitnidq 10043-11-2  ELISAKitBNP豬腦素/腦尿肽規(guī)格：48T/96T

Cadmiumchloride錄化鎘100毫克CP，98.0%  HumanEndotheliallipase,ELELISAKit人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。