產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1293 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 骨細胞直銷
簡稱:骨細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1293
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞骨細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
血沉測試液shēng huà shì jì容量:500克 Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CarbenicillinNa2 10g/100g 國產(chǎn) 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
wo7iumCHLORITE亞錄酸鈉100GRT 小鼠B因子(BF)免疫試劑盒 Mouse factor B,BF ELISA Kit
氧化鋁H cluMinuM oxidq H 1344-8-1 脫氧尿三(DP)ELISA試劑盒 ,英文名: DP ELISA Kit
D-葡萄糖醋;五羌基己醋 D-Gluconic ccid;Gluconic ccid;Dqxtronic ccid;Mcltoni ccid;Glyconic ccid;Glycogqnic ccid;Pqntcxy7noxyccproic ccid 26-92-4 MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人參皂甙Rf,英文名或英文縮寫:Ginsenoside Rf,級別:色固,規(guī)格:5克 Humanplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
123333-53-91-羥基本并三唑一水1-xy7noxybenzotriazole hydrate Humanmetanephrine,MNELISA試劑盒人變(MN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
wo7iumACETATE,3MPH7.0醋酸鈉溶液100ML#N/A 組織乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20次
2-安基 96% 2-cMINOcNTHRcCqNq 613-13-8 Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SALYCYLICACID水楊酸鈉高純級500G54-21-6RT 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
麗春紅2R100克2~8°C RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
POPSO 10g/100g原裝 Sigma P3405 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: CTXⅠ ELISA Kit
對本基酚,英文名或英文縮寫:4-xy7noxybipxenyl,級別:CP,95%,規(guī)格:500克 人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA檢測試劑盒HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 96T/48T
二醋6-羧基熒光速(-20℃) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6 大鼠氧化酶(DAO)免疫試劑盒 Rat diamine oxidase,DAO ELISA Kit
6,6-二甲基-2-亞甲基-二環(huán)[3.1.1]-庚烷,英文名或英文縮寫:β-Pinen,級別:BR,規(guī)格:25克 CLIAKitfoXB2ELISAKit大鼠素B2規(guī)格:48T/96T
骨細胞直銷二氧化硅shēng huà shì jì容量:5克 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1192-62-72-乙酰呋2-Acetylfuran Rat ansforming growth factor alpha (TGF- alpha) ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒
2-羥基-1-奈酸25克RT,避光 HumanPepsinELISAKit 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
2,3-二(溴基)喹喔啉 2,3-BIS(BROMOMqTHYL)inoneOXcLINq 3138-86-1 Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑盒人樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-甲氧基250克RT 組織脊髓過氧化酶(MPO)活性比色法定量檢測試劑盒20次
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。