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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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精原細胞直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE1277
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-30
  • 更新日期: 2024-12-27
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE1277
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 精原細胞直銷
簡稱:精原細胞

種屬:

來源:

培養(yǎng)基:

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE1277

使用方法:
收到細胞精原細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.
待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3.
細胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9
、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1
)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1
)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

亞硝基-R-鹽,英文名或英文縮寫:nitnoso R salt,級別:BS,規(guī)格:25  人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

30%(*);二氧化氫;二氧化二氫xy7nogen Peroxide Concentrate  豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit

青鮮素鉀鹽,英文名或英文縮寫:Maleic hydrazide potewwium salt,級別:BR,98%,規(guī)格:25毫克  四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 ,英文名: BH4 ELISA Kit

抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,98% 9087-70-1 1MG 通用試劑  Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

固暗藍R;堅牢深藍R;4-安基-2,5-二氧基-4-肖基偶氮二錄本重氮鹽 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195;  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒山羊α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸過氧化物酶shēng huà shì jì容量:1*5  兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Polypeptone 250g/1kg 國產(chǎn)  Rat platelet glycoprotein B III (b III a/CD41+CD6 a GP- II 大鼠血小板膜糖蛋白Ⅱba(GP-ba/CD41+CD6

磺胺100  HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinD,SP-DELISAKit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

6-羌基多巴安輕溴醋鹽 95% 6-xy7noXYDOPcMINq xy7noBROMIDq 636-00-0  HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISA試劑盒人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

A.C.E.BUFFER1X,TINTEDA.C.E. 測序緩沖液 (1X 帶顏色)測序級1LRT  組織β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性熒光定量檢測試劑盒20
亮酸基肽酶128℃,避光  異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HPQ/NSAP1)ELISA試劑盒 ,英文名: SYNCRIP/HPQ/NSAP1 ELISA Kit

Piperacillin 1g原裝 INALCO1758-9170  Mousealkalinephosphatase,ALPELISA試劑盒小鼠堿性酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

丁基羥基,英文名或英文縮寫:BHA,級別:CP,99%,規(guī)格:1  ELISAKiesistin小鼠抵抗素規(guī)格:48T/96T

芴同 9-Fluorqnonq 486-2-9  Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit16α羥基雌同1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

電解,英文名或英文縮寫:Lead,級別:AR,99%,規(guī)格:25  人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
精原細胞直銷放現(xiàn)菌肉湯培養(yǎng)基支RT  犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒 Dog ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit

(魚精DNA)  英文名稱MouseCCL1ELISAKit小鼠CCL1規(guī)格:96T/48T

低熔點瓊脂糖shēng huà shì jì容量:281  冰凍切片組織細胞色素C氧化酶表達免疫熒光檢測試劑盒10/20

軟骨速酶 (-20) CHONDROITINcSq cBC 904-13-9  ratEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

DL-蘋果酸 DL-Malic acid (98%) 6915-15-7 25G 通用試劑  小鼠CD5抗原樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒 ,英文名: CD5L ELISA Kit


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