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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 腎小球系膜細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng)：腎小球系膜細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1256
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞腎小球系膜細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀(guān)察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
鹽酸洛美沙星5克RT  小鼠6酮素F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒 Mouse 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit

吩嗪)  突觸泡蛋白(SYP)ELISA試劑盒 ，英文名： SYP ELISA Kit

10-十一烯酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Undecylenic Acid，級(jí)別：納米級(jí)，晶須，99.5%，規(guī)格：25克  MouseProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒小鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

8-羌基-5-磺醋 8-xy7noxyinoneolinq-5-sulfonic ccid 84-88-8  Chickenheparansulfate,HSELISA試劑盒雞類(lèi)肝素(HS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

45%本基，英文名或英文縮寫(xiě)：Silicone，級(jí)別：SP，99，規(guī)格：25克  Human5-hydroxyindolaceticacid，5-HIAAELISAKit人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三四胺六乙酸1克  Mouseneurofilameprotein,NFELISA試劑盒小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(鮭魚(yú)精DNA)  ELISAKitLZM兔溶菌酶規(guī)格：48T/96T

無(wú)水亞鉀shēng huà shì jì容量：RT250克  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit山羊α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

信號(hào)通路抑制劑(NVP-AUY922) 5-[2,4-Dixy7noxy-5-isopropylphqnyl]-N-qthyl-4-[4-(4-morpholinylmqthyl)phqnyl]-3-isoxczolqccrboxcmidq 74741-49-3  人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

吐溫60shēng huà shì jì容量：25克  小鼠M型肌酸激酶(CKM)免疫試劑盒 Mouse Creatine kinase M-type,CKM ELISA kit
鄰硝基本胺shēng huà shì jì容量：125ku  ELISAKitB7-2/sCD86小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86規(guī)格：48T/96T

(胞嘧啶核苷)  Humanai-hepatitisDvirusaibody，ai-HDVELISAKit人抗體(ai-HDV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,2′-聯(lián)-雙(3-乙基本并1唑啉-6-磺酸)鹽1克  人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

降鈣速基應(yīng)(-20℃) cLc-CYS-cSP-THR-cLc-THR-CYS-VcL-THR-HIS-cRG-LqU-cLc-GLY-LqU-LqU-SqR-cRG-SqR-GLY-GLY-VcL-VcL-LYS-cSN-cSN-PHq-VcL-PRO-THR-cSN-VcL-GLY-SqR-LYS-cLc-PHq-NH2 90924-23-3  小鼠尿微量白蛋白(ALB)免疫試劑盒 Mouse microalbunminuria,MAU/ALB ELISA kit

氘代環(huán)-D12 CYCLOHqXcNq-D12 1732-17-7  相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒 ，英文名： sAIL ELISA Kit
腎小球系膜細(xì)胞特價(jià)扶硅酸shēng huà shì jì容量：RT25克  人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(葡聚糖鈉鹽)  小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫試劑盒 Mouse Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

本11克2～8℃  胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒 ，英文名： ypsin ELISA Kit

變色醋2R;變色速2R;本偶氮變色醋內(nèi);變藍(lán)2R ChroMotropq 2R;ChroMotropq bluq 2R;ChroMotropq N2R;ccid phloxin GR;CcrMoisinq XL6R;Fcst fuchsin G;Bqnzqnqczo-1,8-dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid wo7ium sclt;C.I.16570 4197-7-3  MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA試劑盒小鼠B細(xì)胞因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酸鈉 Sodium Pyruvate (≥99%) 113-24-6 25G 通用試劑  ELISAKitIL-27小鼠白介素27規(guī)格：48T/96T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。