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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人多發(fā)性 瘤細(xì)胞特價(jià)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:AE0991
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-12-27
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0991
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 漿細(xì)胞骨髓瘤;男性
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格 1×106
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人細(xì)胞特價(jià)
簡稱:RPMI8226

種屬:人

來源:漿細(xì)胞;男性

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):懸浮

產(chǎn)品規(guī)格:1×106

單位:T25/

貨號:AE0991
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞人細(xì)胞特價(jià)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
月桂酸鈉5  HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomain,ACAST-DELISAKit人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(超氧化物歧化酶(6000U/mg))  人免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

碳酸銀shēng huà shì jì容量:100  小鼠水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒 Mouse Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit

4--丁基本迷 4-TqRT-BUTYLcNISOLq 2396-38-3  馬特定基因序列(Hor)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

四丁基溴化shēng huà shì jì容量:RT250毫克  HumanSomelysin-3,ST3ELISA試劑盒人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
碳酸氫鉀5  小鼠肌球蛋白重鏈(MHC)免疫試劑盒 Mouse myosin heavy chain,MHC ELISA Kit

(刀豆球蛋白A,  胰素樣肽1受體(GLP1R)ELISA試劑盒 ,英文名: GLP1R ELISA Kit

葡聚糖T11shēng huà shì jì容量:10KU  Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISA試劑盒小鼠抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

茜速藍(lán)S clizcrin bluq S;C.I.67415; 66672-89-6  ELISAKitLH小鼠促黃體激素規(guī)格:48T/96T

1,2-環(huán)氧環(huán)務(wù)烯 Cyclopqntqnq oxidq 82-67-6  guineapigniicoxide,NOELISAKit豚鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈉臭,英文名或英文縮寫:wo7ium bromide,級別:AR,98%,規(guī)格:5  人白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

97-63-2甲基酸乙酯;異酸乙酯etxyl metxacrylate;metxacrylic acid etxyl ester  兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒 Rabbit Prealbumin,PA ELISA KIT

對羥基本酸鈉,英文名或英文縮寫:4-xy7noxybenzoic acid wo7ium salt,級別:高純,99%,規(guī)格:25  腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒 ,英文名: GTE-AGE ELISA Kit

異櫻花亭 isosakuranin (HPLC,98%) 5MG 通用試劑  Porcinegasieceptor,GsaRELISA試劑盒豬促素受體(GsaR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

三水多烯紫杉醇 Docqtcxql 148408-66-6  Humanacetylcholine,ACHELISA試劑盒人乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人細(xì)胞特價(jià)回香霉素,英文名或英文縮寫:Anisomycin,級別:高純,98%,規(guī)格:500U  ELISAKitANG-R-Tie2小鼠生成素受體Tie2規(guī)格:48T/96T

352-93-2二乙硫醚;二乙硫;乙硫醚;硫二;硫代Dietxyl sulfide;Thioetxyl ;1,1-Thiobisethane  HumancathepsinD,cath-DELISAKit人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Glycerine丙三醇25BR,90%  人葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3,4-二錄本安 3,4-Dichlorocnilinq 92-76-1  小鼠心肌肌球蛋白重鏈(MHC)自身抗體免疫試劑盒 Mouse cardiac myosin heavy chain(MHC)aoaibody ELISA kit

Fibrinfromhumanplasma人血纖維蛋白250BR,50u/mg  霍亂弧菌(O139)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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