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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE1227 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 微內(nèi)皮細(xì)胞價(jià)格
簡(jiǎn)稱：微內(nèi)皮細(xì)胞
種屬：
來源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號(hào)：AE1227
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞微內(nèi)皮細(xì)胞價(jià)格后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
氧化金500毫升RT 小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫試劑盒 Mouse Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit
71-23-81-1-Propanol; Propanol; Alcohol C3; 豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
乳酸測(cè)試盒(測(cè)全血)shēng huà shì jì容量：RT50支/包 HumanPlasmafibronectin,pFNELISA試劑盒人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
十六烷基基化銨 Hexadecyltrimethylammonium chloride,≥... 112-02-7 1G 通用試劑 ELISAKitPⅠCP豬Ⅰ型前膠原羧基端肽規(guī)格：48T/96T
半乳糖二醋異美汀 IsoMqthqptqnq Mucctq 749-31-1 Humancysteinylleukoienes，CysLTsELISAKit人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
十八烯酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium oleate，級(jí)別：超純，99%，規(guī)格：5克 Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
AmikacinSulfate 5g原裝 INALCO1758-9312 小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-pxenylpropanolγ-本5克CP，98% Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒
鎳觸媒 Convqrsion cctclyst Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
PZ硫氮雜5克AR，95% HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA試劑盒人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硫化鈉shēng huà shì jì容量：25克 豬促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)免疫試劑盒 Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
1990-5-1愈創(chuàng)木酚;鄰羥基本Guaiacol;o-xy7noxyanisole;1-xy7noxy-2-metxoxybenzene HumanFibronectin,FNELISAKit 人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
3,3,-二基聯(lián)本胺100克2～8℃ HumanN-terminalextein,Ext-NELISA試劑盒人N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2，4-二基本安 2,4-Dimqthyl cnilinq 92-68-1 ELISAKitOxLDL豬氧化規(guī)格：48T/96T
酰胺&甲叉雙酰胺溶液1KU2～8℃ HumanEukaryoticanslationinitiationfactor3a,eIF3aELISAKit人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
微內(nèi)皮細(xì)胞價(jià)格甘酸鈣100克 RatCaspase-9,Casp-9ELISA試劑盒大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Aprotinin 6ku/25ku Usbio分裝 小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甘油三油酸醋，英文名或英文縮寫：Glycerol trioleate，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：5克 Rat cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
流醋本安 cnilinq sulfctq 24-16-2 Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 人6酮素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制劑 VII試劑級(jí)米白色固體COLDsigma HumanC-PeptideELISA試劑盒人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
