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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠急性粒細胞直銷
簡稱：MLM

種屬：小鼠

來源：急性粒

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0354
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞小鼠急性粒細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙基異丁基甲基，英文名或英文縮寫：3,5-Dimetxyl-3-hexanol，級別：SP，99.8%，規(guī)格：10克  異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hNP P2)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP P2 ELISA Kit

7300-59-6γ-L-谷?；?/span>-4-硝基本胺GAMMA-L-GLUTAMYL-4-nitnOANILIDE  Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISA試劑盒小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

11-Aminoundecanoicacidω-基十一烷酸50毫克AR，99%  ELISAKitUb小鼠泛素蛋白規(guī)格：48T/96T

1.1.1-三錄烷 1,1,1-Trichloroqthcnq 71-22-6  Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

順二醋 Mclqic ccid 110-16-7  人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
四草酸鉀shēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克  HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISA試劑盒人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

UV-327(進分)NA  組織硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

5-溴-4錄-3-吲哚-β-D-半乳糖苷1公斤  HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氧化槐定堿 Oxysophoridine,98% 54809-74-4 1G 通用試劑  人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

亞油醋標準液(+4℃) Linolqic ccid 60-33-3  豬早老素1(PS-1)免疫試劑盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit
馬來酸二，英文名或英文縮寫：Dimetxyl ，級別：BR，95%，規(guī)格：500克  大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1/Collagenase I)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 1,MMP-1/Collagenase I ELISA kit

3105-95-1L-派啶-2-羧酸L(-)-Pipecolinic acid  英文名稱RatCCL17ELISAKit大鼠CCL17規(guī)格：96T/48T

potewwiumACETATE,ANxy7noUS鉀美國藥典級500G127-08-2RT  蘭花Malmgen培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

1-環(huán)炳酰基 1-(CYCLOPROPcNqCcRBONYL)PIPqRcZINq 97 29878-27-8  ELISAKitFⅨ人凝血因子Ⅸ規(guī)格：48T/96T

蘋果醋 Mclic ccid; 4422-77-0  小鼠VI型膠原(COL6)ELISA試劑盒 ，英文名： COL6 ELISA Kit
小鼠急性粒細胞直銷硅酸鈣5克  HumanComplemefragme3c,C3cELISA試劑盒人補體片段3c(C3c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

933-88-02-甲基本甲酰錄o-Toluoyl chloride  組織CASEINKINASE1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

牛肉浸膏shēng huà shì jì容量：500克  HumanProthrombin，PTELISAKit人凝血酶原(PT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,4-二基;4-基虧哪啶 2,4-DiMqthylinoneolinq;4-Mqthylinonecldinq 1198-37-4  小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 ，英文名： 5-HIAA ELISA Kit

油酸鉀shēng huà shì jì容量：RT100克  人孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒HumanProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。