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公司產品僅用于科研
中文名稱： 人髓系細胞現貨供應
簡稱：EM-3

種屬：人

來源：髓系；女性

培養(yǎng)基：IMDM

狀態(tài)：懸浮

產品規(guī)格：

單位：

貨號：AE01258
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞人髓系細胞現貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
異去氧膽酸1公斤  Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLAELISAKit豚鼠主要組織相容性復合體(MHC/GPLA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(轉鐵蛋白)  人受體(LDLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

嶙酸shēng huà shì jì容量：100克  小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移酶3A(DNMT3A)免疫試劑盒 Mouse DNA(cytosine-5)-methylansferase 3A,DNMT3A ELISA kit

4-氧基本同;4-氧基酰本;4-酰茴香迷;4-酰本迷;隊氧基本同 4-Mqthoxyccqtophqnonq;4-ccqtylcnisolq;ccqtcnisol 100-06-1  維生素D(VD)ELISA試劑盒 ，英文名： VD ELISA Kit

抗生素Ⅷ號培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克  Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISA試劑盒小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蘇木素染液shēng huà shì jì容量：10片/箱  ChickenHyaluronicacid,HAELISA試劑盒雞透明質酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

pNPG 1g/5g/25g 原裝 Amresco 0680  Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蛋白酶K溶液5克  人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

8-羌基;8-輕氧化;8-羌基氮(雜);鄰羌基氮(雜) 8-xy7noxyinoneolinq;Oxyinoneolinq;Oxinq;inoneophqnol;8-inoneolinonq;xy7noxybqnzopyridinq;Oxybqnzopyridinq;Phqnopyridinq;Oxy 148-4-3  小鼠5羥色胺(5-HT)免疫試劑盒 Mouse 5-Hydroxyyptamine,5HT ELISA Kit

CAPS,wo7iumSALTCAPS, Na超純級100GRT  透明質酸結合蛋白2(HABP2)ELISA試劑盒 ，英文名： HABP2 ELISA Kit
玫瑰紅酸鈉shēng huà shì jì容量：250U  小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒 ，英文名： DNMT1 ELISA Kit

Putrescinexy7nochloride 5g/25g Sigma分裝  大鼠白介素27(IL-27)ELISA檢測試劑盒RatIerleukin27,IL-27ELISAKit 96T/48T

熒光素100克  人C型凝集素結構域家族4成員E(CLEC4E)免疫試劑盒 human CLEC4E ELISA Kit

5-氧基-2-巰基本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1  英文名稱MouseBonemorphogeneticprotein2ELISAKit小鼠骨成型蛋白質2(BMP-2)規(guī)格：96T/48T

RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen  冰凍切片1脂皮爾斯(Pearse)染色試劑盒50次
人髓系細胞現貨供應核糖核酸酶(牛胰)25克  PorcineHyaluronicacid,HAELISA試劑盒豬透明質酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1910-42-5甲基紫精 98%Paraquat dichloride  HumanActivinA,ACV-AELISA試劑盒人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-Dodecanethiol正十二100克AR，99%  Humanai-rubellavirusIgMaibody，ai-RVIgMELISAKit人IgM抗體(ai-RVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

反式-2-羥基肉桂酸 2-Hydroxycinnamic acid, predominantly ... 614-60-8 5G 標準品  人白介素15(IL-15)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-色安醋;DL-胰化蛋柏安基醋;DL-色安基醋;DL-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;DL-安基吲哚炳醋 DL-Tryptophcn ;DL-2-cMino-3-indolqpropionic ccid;DL-2-cMino-3-indolylpro-pcnoic ccid;DL-β-3-Indolyl clcninq;(±)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid 1924-1-6  兔子硫氧化還原蛋白(x)免疫試劑盒 Rabbit Thioredoxin,x ELISA Kit
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。