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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠內(nèi)皮細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：C166

種屬：小鼠

來源：內(nèi)皮

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01177
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠內(nèi)皮細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
β-Sitosterol  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O    應(yīng)急反應(yīng)生長(zhǎng)因子-1   英文名稱：   Early growth response 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EGR-1

β-Anhydrouzarigenin  中文名：  分子式：C23H32O3    轉(zhuǎn)錄因子E2F1   英文名稱：   anscription factor E2F1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   E2F1

α-Tocopherolquinone  中文名：  分子式：C29H50O3    腺來源的內(nèi)皮生長(zhǎng)因子   英文名稱：   endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EG-VEGF

α-Spinasterone  中文名：  分子式：C29H46O    中性粒細(xì)胞蛋白酶抑制劑Elafin   英文名稱：   neuophil elastase inhibitor Elafin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Elafin

α-Spinasterol glucoside  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6    游離脂肪酸（NEFA）檢測(cè)   Total iron binding (TIBC) detection
組織無機(jī)0含量測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣  4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  中文名：  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%

組織鐵測(cè)定試劑盒（比色法）  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  中文名：  分子式：C8H8O4  度：%

組織及血液酸性0酸酶（ACP）試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣  Pazopanib  444731-52-6  中文名：帕唑帕尼  分子式：C21H23N7O2S  度：98.0%   

組織及血液堿性0酸酶（AKP/ALP）試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣              Pazopanib  444731-52-6  中文名：帕唑帕尼  分子式：C21H23N7O2S 

組織PKG-I激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2  度：99.0%  小鼠α羥基脫氫酶elisa試劑盒   小鼠α羥基脫氫酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α羥基脫氫酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α羥基脫氫酶試劑盒、小鼠α羥基脫氫酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Abscisic acid  中文名：脫落酸  分子式：C15H20O4  度：99.0%  小鼠α葡萄糖苷酶elisa試劑盒   小鼠α葡萄糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α葡萄糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α葡萄糖苷酶試劑盒、小鼠α葡萄糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  中文名：(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%  小鼠α干擾素elisa試劑盒   小鼠α干擾素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠α干擾素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α干擾素試劑盒、小鼠α干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

2-Amino-3-Formylchromone  中文名：2-氨基-3-甲?；?/span>  分子式：C10H7NO3  度：98.0%  小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Acid Black 1  中文名：酸性黑 1  分子式：C22H14N6Na2O9S2  度：99.0%  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞特價(jià)唾液酸（SA）檢測(cè)   Apoptosis (TdT mediated by in situ end of the double labelling method) detection  Axitinib  319460-85-0  中文名：阿西替尼  分子式：C22H18N4OS 

唾液酸（SA）測(cè)試盒（帶SA標(biāo)準(zhǔn)）   Saliva acid (SA) test case (with SA standard)  Ampicillin Trihydrate  7177-48-2  中文名：氨芐西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

唾液酸（SA）測(cè)定試劑盒（帶SA標(biāo)準(zhǔn)）（比色法）                    Physaminimin C  1582259-03-7  中文名：  分子式：C28H38O8 

脫脂奶粉   100g  Amoxicillin trihydrate  61336-70-7  中文名：羥氨芐青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%   

脫氧核糖核酸酶I   100mg  Amoxicillin  26787-78-0  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。