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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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人永生化角質形成細胞現(xiàn)貨供應
  • 品牌:帛科
  • 產地:科研
  • 貨號:AE0504
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-28
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0504
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 皮膚;自發(fā)永生;男性
細胞形態(tài) 貼壁
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產品僅用于科研
中文名稱: 人永生化角質形成細胞現(xiàn)貨供應
簡稱:Hacat

種屬:人

來源:皮膚;自發(fā)永生;男性

培養(yǎng)基:DMEM

狀態(tài):貼壁

產品規(guī)格:

單位:

貨號:AE0504

使用方法:
收到細胞人永生化角質形成細胞現(xiàn)貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.
待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3.
細胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4
、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8
、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9
、培養(yǎng)細胞密度:調整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1
)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1
)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Fenticonazole nitrate  73151-29-8  中文名:硝酸芬替康唑  分子式:C24H21Cl2N3O4S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠鼠總抗氧化能力(T-AOC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Fenofibric acid  42017-89-0  中文名:非諾貝特酸  分子式:C17H15ClO4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠鼠病毒抗體(MPV-AbELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Fenbendazole  43210-67-9  中文名:芬苯達唑  分子式:C15H13N3O2S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠鼠病毒(MPVELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Fenazox  61618-27-7  中文名:氨芬酸鈉  分子式:C15H14NNaO4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Felodipine  72509-76-3  中文名:非洛地平  分子式:C18H19Cl2NO4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  中文名:  分子式:C23H19N3O4 

小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Benzo-18-crown-6 ether  14098-24-9  中文名:苯并-18-6-  分子式:C16H24O6 

小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  136285-67-1  中文名:  分子式:C23H19N3O4  度:98.0%  關鍵詞: 

小鼠可溶性白細胞分化抗原30(sCD30)Elisa試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  136285-67-1  中文名:  分子式:C23H19N3O4 

小鼠可溶性白介素-2受體(mouse sIL-2R)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Carvedilol  72956-09-3  中文名:卡維地洛  分子式:C24H26N2O4
2-Hydroxyquinoxaline  1196-57-2 
中文名:  分子式:C8H6N2O    Humaheumatoidfactor,RFELISAKit 人類因子(RF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Sulfaquinoxaline  59-40-5  中文名:磺胺喹噁啉  分子式:C14H12N4O2S    HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISA試劑盒人胞漿型0脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Metamizole   68-89-3  中文名:安乃近  分子式:C13H16N3NaO4S    組織IGF-1R激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

Valsartan  137862-53-4  中文名:纈沙坦  分子式:C24H29N5O3    Humanplateletactivatingfactor,PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Metronidazole  443-48-1  中文名:甲硝唑  分子式:C6H9N3O3    兔子(INS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人永生化角質形成細胞現(xiàn)貨供應trans-4-Aminocyclohexanol  27489-62-9  中文名:  分子式:C6H13NO  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠過氧化物酶體增殖物活化受體γ   英文名稱:   Mouse Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   PPARγ

Tranexamic acid  1197-18-8  中文名:凝血酸  分子式:C8H15NO2  度:98.0%      小鼠誘導型合成酶elisa試劑盒   小鼠誘導型合成酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠誘導型合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠誘導型合成酶試劑盒、小鼠誘導型合成酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

Torososide A  165689-32-7  中文名:  分子式:C38H32O15  度:關鍵詞:  植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠內皮型合成酶elisa試劑盒   小鼠內皮型合成酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠內皮型合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠內皮型合成酶試劑盒、小鼠內皮型合成酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

Topiramate  97240-79-4  中文名:托吡酯  分子式:C12H21NO8S  度:98.0%  關鍵詞:    豚鼠神經肽Belisa試劑盒   豚鼠神經肽B試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠神經肽B試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠神經肽B試劑盒、豚鼠神經肽Beisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

Tolvaptan  150683-30-0  中文名:托伐普坦  分子式:C26H25ClN2O3  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠游離脂肪酸elisa試劑盒   小鼠游離脂肪酸試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠游離脂肪酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠游離脂肪酸試劑盒、小鼠游離脂肪酸eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。


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