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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：周細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：周細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1331

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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胰蛋白酶(豬胰)，英文名或英文縮寫：Trypsin(porcine pancreas)，級(jí)別：BR，100-250u/mg，規(guī)格：500克  豬S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒 Pig Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit

7791-7-3一水高錄酸鈉wo7ium PERCHLORATE MONOHYDRATE  病毒H7亞型(AIV-H7)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T

APS-TEMEDTAETSAPS/TEMED 聚合生物技術(shù)級(jí)白色至微黃色COLDsigma  HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2--1,3-二甲基咪... 2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium h... 164298-27-5 5G 通用試劑  ELISAKitpERK豬化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶規(guī)格：48T/96T

呋他同 Furcltcdonq 139-91-3  HumanechinococcusaibodyIgGELISAKit人包蟲抗體IgGELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
微量可調(diào)移液器P20shēng huà shì jì容量：5克  Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISA試劑盒小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(電泳等電點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)PH2.5-6.5)  ELISAKitMCP-3/CCL7小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3規(guī)格：48T/96T

L-脯酰胺25克  Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

9-基 9-Mqthylcnthrccqnq 779-0-  人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

FERROUSSULFATE,ANxy7noUS亞鐵,無水美國(guó)藥典級(jí)1KG7720-78-7RT  小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit
三氧化二釓，英文名或英文縮寫：Gadolinium(III)oxide，級(jí)別：CP，97%，規(guī)格：5克  人白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

141-53-7鈉;蟻鈉wo7ium forMateHCOONa  兔子硫酸類肝素(HS)免疫試劑盒 Rabbit heparan sulfate,HS ELISA Kit

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辛伐他汀 Simvastatin (HPLC,≥97%) 79902-63-9 20MG 通用試劑  PorcineImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒豬免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DL-絲安醋;DL-蠶絲安基醋;DL-2-安基-3-羌基炳醋;DL-β-羌基炳安醋 DL-Sqrinq;DL-2-cMino-3-xy7noxypropionic ccid;DL-β-xy7noxyclcninq;(±)-2-cMino-3-xy7noxypropionic ccid; DL-3-xy7noxy-α-clcninq 30-84-1  Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISA試劑盒人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
周細(xì)胞免疫血清兔抗人γ鏈500克  人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit 96T/48T

73-03-0蟲草素(-20℃)Cordycepin  大鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒 Rat Myosin,MYS ELISA Kit

本基瓊脂糖凝膠6FF(低分辨率)shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫克  英文名稱RatCCL1ELISAKit大鼠CCL1規(guī)格：96T/48T

基炳烯酰醋2-(叔丁安基)酯 2-(TqRT-BUTYLcMINO)qTHYL MqTHcCRYLcTq 3772-90-4  藍(lán)藻甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒10次

馬鈴薯葡萄糖肉湯shēng huà shì jì容量：RT支  ELISAKitT-TM人凝血酶調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物規(guī)格：48T/96T
注意事項(xiàng)：
周細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。