產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E0048 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 胚胎;成纖維;自發(fā)永生;雄性;NIH Swiss |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 小鼠 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NIH/3T3細(xì)胞 | 瓶 | E0048 |
產(chǎn)品簡稱:NIH/3T3細(xì)胞
中文名稱:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
規(guī)格:瓶
種屬:小鼠
來源:胚胎;成纖維;自發(fā)永生;雄性;NIH Swiss
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號(hào):E0048
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
注意事項(xiàng):
NIH/3T3細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太小;
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
Dronedarone hydrochloride 141625-93-6 中文名:鹽酸決奈達(dá)隆 分子式:C31H45ClN2O5S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒
Drevogenin A 10163-83-4 中文名: 分子式:C28H42O7 度:% 關(guān)鍵詞: 孕甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISAKit
Dregeoside Ga1 98665-66-8 中文名: 分子式:C49H80O17 度:93.0% 關(guān)鍵詞: 南山藤; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISAKit
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去甲氧基表鬼臼 HPLC≥98% 20mg MouseDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,二甲基呫噸酮乙酸 HPLC≥98% 20mg MouseDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,二羥基色原酮 HPLC≥98% 20mg Mousedeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O甲基維斯阿米醇苷 HPLC≥98% 20mg Mousediamineoxidase,DAOELISAKit小鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肌苷一二鈉鹽 HPLC≥98% 20mg Mousediamineoxidase,DAOELISA試劑盒小鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲基甲氧基異黃酮 HPLC≥98% 20mg MousedipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISA試劑盒小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲基胞嘧啶 HPLC≥98% 50mg MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鳥苷一二鈉鹽 HPLC≥98% 20mg MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg Mousedopamine,DAELISA試劑盒小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit Adipic dihydrazide 中文名:己二酸二 分子式:C6H14N4O2 度:99.0%
兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒 5-O-Ethylcleroindicin D 488138-32-5 中文名: 分子式:C10H16O4 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit 4-Benzoyloxy-2-azetidinone 28562-58-5 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3
兔胰淀素(Amylin)ELISAKit 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 中文名: 分子式:C9H14O4 度:%
兔樣生長因子1(rabbit IGF-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
NIH/3T3細(xì)胞2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C13H16FN3O6 度:98.0% 兔子組織因子(TF)ELISAKit
Capecitabine 中文名:卡培他濱 分子式:C15H22FN3O6 度:98.0% 兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit
4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名: 分子式:C12H15N3O 度:95.0% 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit
Valsartan methyl ester 中文名: 分子式:C25H31N5O3 度:98.0% 兔子脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISA試劑盒
α-D-Glucose 中文名:α-D-葡萄糖 分子式:C6H12O6 度:98.0% 兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒