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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP7353 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說明書% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Vibrio parahemolyticus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞6-氮雜尿嘧啶shēng huà shì jì容量：RT，避光25克
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL茜素 Alizarin,97% 72-48-0 5G 通用試劑
人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg二言醋組安 Histcminq dixy7nochloridq 1926/9/8
PCNA Others Human 人 PCNA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) LOADINGDYEBASE,25X25X 蛋白電泳上樣染料超級(jí)暗紫色微粘稠液體RTsigma
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO444-94-8兒價(jià)級(jí)兒流(劇毒)7m7w
SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞，人細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,HBE細(xì)胞 腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)CLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)CLA
兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCFBFMCLA (>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)MCLA
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) FCLA 自由酸[化學(xué)發(fā)光試劑]質(zhì)量規(guī)格：化學(xué)發(fā)光試劑FCLA Free Acid
CL-0143Lncap clone FGC(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2紅-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)質(zhì)量規(guī)格：含氮量：9.00-10.30 %Red-CLA
CTSZ Others Human 人 CTSZ 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 13X分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱專用)質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱專用Molecular sieves Type 13X
CLDN11 Others Human 人 CLDN11 / Claudin-11 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非動(dòng)物源500 gm60-18-4RT
骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells牛膽鹽 Bilq sclt,froM ox;
HS-6細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 德氏乳桿菌保加利亞亞種 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y,CRYSTALLINE(環(huán)已亞胺)超級(jí)1GCOLD
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙炔-1,2-二羧酸shēng huà shì jì容量：100克
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 人細(xì)胞;LNCaP(蛋白胨)
副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒MCF-7/Adr 腺癌/阿霉素耐藥株2,7-雙(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼環(huán)-2-基)-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-di-n-octylfluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 苯并環(huán)丁1(>94.0%(GC))Benzocyclobutene質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(GC)
貓腎細(xì)胞;CRFK9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC))9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,7-二溴菲-9,10-二酮(>97.0%(GC))2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
95-C 低轉(zhuǎn)移萘-1,4,5,8-四羧酸二酐(>95.0%(HPLC)(T))Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)
