產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7348 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:霍亂弧菌1型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Vibrio choleraeO1
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
霍亂弧菌1型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
CM-R064大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL2,2'-二氨基-4,4'-雙噻唑(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2,2'-Diamino-4,4'-bithiazole
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3 小鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1H-咪唑-4,5-二羧酸(>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)1H-Imidazole-4,5-dicarboxylic Acid
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)2,6-Naphthalenedicarboxylic Acid
KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,4-萘二羧酸(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)1,4-Naphthalenedicarboxylic Acid
人細(xì)胞;MGC-8031,4-雙(*基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne
SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-鳥氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Ornithine monohydrochloride
人間充質(zhì)干細(xì)胞(肝臟)cDNAHMSC-hp cDNAD-苯丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:0.98H-D-Phe-OtBu.HCI
U937細(xì)胞,組織細(xì)胞瘤 人肺巨細(xì)胞癌(PG)的低轉(zhuǎn)移亞系,PG-LH7細(xì)胞 腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-脯氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Proline
犬源細(xì)胞D-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRD-Phenylalanine
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Alanine
T-102B胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)10mL正十九烷,英文名或英文縮寫:Nonadecane,級(jí)別:AR,98%,規(guī)格:1克
CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 流化鋇 BcriuM sulfidq;Sulfurctqd bcrytc
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長添加物OPCGS二氧嶙基鉬酸水合物,英文名或英文縮寫:Ammonium phosphomolybdate hydrate,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:25克
KLE細(xì)胞,人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 大鼠細(xì)胞,CRL-1548細(xì)胞 原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml氧化鎵shēng huà shì jì容量:RT10克
HA(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(Horseradish)辣根過氧化物酶
霍亂弧菌1型探針法熒光定量PCR試劑盒人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901] 大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL羥基利托那韋Hydroxy Ritonavir質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
MLTC-1 小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞去噻唑基甲氧基碳酰 利托那韋Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
IL5RA Others Human 人 IL5Ra / CD125 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 9'-去甲格拉司瓊(格拉司瓊雜質(zhì)C)9'-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity C)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
酶活性分析試劑盒CAT7-磺酰胺基-N-羥甲基氫氯噻嗪7-Sulfonamido-N-hydroxymethyl Hydrochlorothiazide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-氯氫氯噻嗪5-Chloro Hydrochlorothiazide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。