產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7288 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:潰蝕齒密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Treponema phagedenis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
潰蝕齒密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
小鼠中腦縫神經(jīng)細(xì)胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人細(xì)胞 HumanLGD-4033 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLGD4033
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC5-溴嘧啶質(zhì)量規(guī)格:>98%5-Bromopyrimidine
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿螺旋霉素質(zhì)量規(guī)格:HSP90 抑制劑,進(jìn)分17-DMAG
臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)大豆異黃酮質(zhì)量規(guī)格:染料木素17%-20%,異黃酮含量在40-50%Soybean isoflavones
蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36 人細(xì)胞,NCI-H1299細(xì)胞 A-431(表皮癌細(xì)胞)表戈米辛O(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Epigomisin O
白細(xì)胞介素-17超家族非草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Fenuron
人周細(xì)胞 (HBVP) ( 5×105 ) 人臍平滑肌細(xì)胞 MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞丁(B9)(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Daminozide
CM-R041大鼠肝星形細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B 質(zhì)量規(guī)格:BSSulforhodamine B
IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B 質(zhì)量規(guī)格:BS Sulforhodamine B
人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC氯化羅丹明110;羅丹明110質(zhì)量規(guī)格:>99%Rhodamine 110 chloride
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5正嶙酸鐵四水物shēng huà shì jì容量:100克
VCL Others Mouse 小鼠 VCL / Vinculin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,6-二酚 2,6-,99% 100G 通用試劑
CL-0109HK-2(人腎小管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2乳果糖;;;4-O-β-D-半乳糖基-4-D-呋果糖 Lcctulosq;4-O-β-D-Glcctosyl-D-fructosq;Lcqvilcc 4618-18-
KMB-17細(xì)胞,人二倍體細(xì)胞系 轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞,T2細(xì)胞 KM小鼠子瘤株;U27納他霉素,英文名或英文縮寫:Pimaricin,級(jí)別:BR,規(guī)格:100毫克
B16(小鼠色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(錄化溶液)
潰蝕齒密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC 細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 Walker-256細(xì)胞,大鼠細(xì)胞(癌細(xì)胞接種到肝臟成瘤)D-賴氨酸鹽酸鹽H-D-Lys-OH·HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HCT116, 人結(jié)細(xì)胞 HumanD-甘露糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Mannose質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-辛?;?/span>-N-甲基葡糖胺(MEGA-8)N-Octanoyl-N-methylglucamine質(zhì)量規(guī)格:≥97% ,進(jìn)分
平衡鹽溶液HBSSN-癸?;?/span>-N-甲基葡糖胺(MEGA-10)N-Decanoyl-N-methylglucamine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。