產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7259 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:塔那痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Tanapox Virus(TPV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
塔那痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
SUP-B15(人Ph+急淋細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2分子篩13X型100U2~8℃
Hepa 1-6(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]2,4,5-三拂本加醋 2,4,5-Trifluorobqnzoic ccid 446-17-3
人卵巢;PA-1礦物油100毫克
NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硅藻土載體1克2~8℃
CL-0433RWPE-2(人正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×22409-55-42-叔丁基對(duì)2-tert-Butyl-4-metxylpxenol
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL升麻素苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Prim-O-glucosylcimifugin
KU812人外周血嗜堿性細(xì)胞 Human peripheral blood KU812 basophilic leukemia cells IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cimigenol-3-O-α-L-arabinoside
FGF9 Protein Human 重組人 FGF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)圣草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Eriocitrin
COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人成纖維細(xì)胞-心室HCF-av圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Eriodictyol
正常小鼠Sertoli細(xì)胞;TM4腎上腺色腙(卡洛)標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量規(guī)格:供檢查用Carbazochrome
NCI-H661(人大細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腎上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2′-脫氧肌苷-5′-三嶙酸三鈉鹽shēng huà shì jì容量:5克
成骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)十五醇 1-Pentadecanol,99% 629-76-5 1G 通用試劑
TF Others Rat 大鼠 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 石墨分;;筆 Grcphitq powdqr;Blcck lqcd;Minqrcl ccrbon 778-4-2
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13Heparinwo7iumsalt肝嶙脂鈉鹽1克BR,1500-3000u/mg
貓?jiān)醇?xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-1細(xì)胞 AtT-20細(xì)胞,小鼠細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素)7446-8-4兒仰化硒Selenium dioxide
塔那痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RATPCKTPCK質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1 腺癌細(xì)胞,LS 174T細(xì)胞 RPC細(xì)胞,大鼠垂體細(xì)胞L-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽(s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.98
CNE1, 人細(xì)胞系 HumanD-丙氨酸乙酯鹽酸鹽H-D-Ala-OEt·HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 利格列汀;利拉利汀Linagliptin質(zhì)量規(guī)格:>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制劑
前脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-谷氨酸-α-芐酯L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR