產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7252 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
RT-豬病毒型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:RT-豬病毒型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Suid Herpesvirus-1(SuHV-1) I
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SF9, 昆蟲卵巢細胞 其它疊氮-赤-鞘氨醇質量規(guī)格:美國進口Azido-erythro-sphingosine
CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-赤-二氫鞘氨醇質量規(guī)格:美國進口DL-erythro-Dihydrosphingosine
人滋養(yǎng)層絨毛細胞裂解物HVTLD-赤-二氫-D-鞘氨醇-1-1酸鹽質量規(guī)格:美國進口D-erythro-Dihydro-D-sphingosine-1-phosphate
IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照) 籠形D-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽質量規(guī)格:美國進口Caged D-erythro-Sphingosine-1-phosphate
BALB/C小鼠肝上皮細胞;BNL 1ME A.7R.1L-(-)-葡萄糖(標準品)質量規(guī)格:>98%,標準品L-(-)-Glucose
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2 人癌細胞,MCF-7細胞 SPC-A-1()地美司鈉質量規(guī)格:美國進口Dimesna
人卵巢;PA-1甲磺酸多拉司瓊質量規(guī)格:>98.5%,BRDolasetron mesylate
ICAM2 Others Human 人 CD102 / ICAM2 人細胞裂解液 (陽性對照) 地拉羅司,去鐵斯若質量規(guī)格:>99.0%Deferasirox
CM-H069人膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL地拉羅司(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Deferasirox
CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人細胞裂解液 (陽性對照) 利培酮質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Risperidone
成纖維細胞培養(yǎng)基FM-sfTIBA2,3,5-三代本酸5克CP,99%
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-(4-叔丁基苯)-5-(... 2-(4-tert-Butylphenyl)-5-(4-biphenylyl... 15082-28-7 5G 通用試劑
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN務二晴punum>98% Glutcronitnilq 244-13-8
F2-2細胞,5-8轉基因細胞系 小鼠色素瘤細胞,B16BL6細胞 CM-H047人肝竇內皮細胞完全培養(yǎng)基100mLTOTALPROTEINCELLLYSISBUFFER總蛋白細胞裂解緩沖液蛋白組學級透明無色液體COLDsigma
NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞) 5×106cells/瓶×21343-88-0硅酸載體 silicate
RT-豬病毒型探針法熒光定量PCR試劑盒幼蚊細胞;C6/36 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤,PC-12細胞 HeLa 229(細胞)L-異亮氨酸叔丁酯鹽酸鹽L-Isoleucine t-butyl ester hydrochloride質量規(guī)格:>98%,BR
人上皮細胞;Hep-2L-谷氨酰胺(標準品)L-Glutamine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人細胞裂解液 (陽性對照) 谷胱甘肽(還原型)Glutathione (Reduced);GSH質量規(guī)格:>98%,BR
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)L-谷胱甘肽(標準品)Glutathione (Reduced)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品,還原型
F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) 谷胱甘肽(氧化型)Glutathione(Oxidized)質量規(guī)格:度大于98%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。