產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7251 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Subulura brumpti
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293D-谷酰胺10克RT
ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑
HCC827 人非小細胞細胞拂化 litxium fluoridq 7789/4/4
2V6.11人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS輔酶A10克RT
TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白PH緩沖液 PH5.0(20℃)NA
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2N-(1,3,4-Thiadiazolyl)煙酰胺質量規(guī)格:美國進口N-(1,3,4-Thiadiazolyl)nicotinamide
FN1 Others Human 人 Fibronectin / Fibronectin Fragme 2 人細胞裂解液 (陽性對照) β-煙酰胺單核苷酸質量規(guī)格:美國進口β-Nicotinamide mononucleotide
615小鼠T細胞性瘤株;L7712環(huán)丙孕酮質量規(guī)格:美國進口Cyproterone
MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 (207 Ser/Asp, 211 Thr/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 15β-羥基醋酸環(huán)丙孕酮質量規(guī)格:美國進口15β-Hydroxy Cyproterone Acetate
CM-M017小鼠胰腺導管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL咽側體抑制素Ⅳ質量規(guī)格:>95%,BRAllatostatin IV
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) ZincAcetateDihydrate醋酸鋅二水美國藥典級白色精細粉末RTsigma
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1暈苯 Coronene,97% 191-07-1 100MG 通用試劑
正常大鼠腎細胞;NRK 腺癌細胞,COLO-320細胞 ST細胞,豬細胞系(ST)務二臘酐 Glutcric cnhydridq 108-22-4
Ca Ski, 人細胞 HumanDigitonin洋地黃皂苷5克BR,95%
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 佛手油NA
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標簽)DL-半胱氨酸DL-Cysteine 質量規(guī)格:>97%,易氧化
小鼠神經(jīng)質細胞(MN-sn)(1×106) T24, 人細胞 HumanL-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽L-Glutamine t-butyl ester hydrochloride質量規(guī)格:0.98
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)L-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽L-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochloride 質量規(guī)格:>95%,BR
GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽Bzl-Gly-OH·HCl質量規(guī)格:0.98
皮膚肥大細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)甘氨酸芐酯鹽酸鹽Glycine benzyl ester hydrochloride質量規(guī)格:0.98
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。