產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6989 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma pneumoniae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細胞裂解液 (陽性對照) 虎紅1公斤
腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2,4-二肖基酚(劇讀)(易制暴) 2,4-phqnol 1921/8/2
CA46細胞,人Butts瘤細胞系 小鼠Lewis瘤株,LLT細胞 人肝臟星形細胞裂解物HHSteCL鈣黃綠素500克
NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2葡萄糖酸鹽,英文名或英文縮寫: gluconate,級別:BR,土豆來源,規(guī)格:10克
CCRF-CEM(人急性細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0094HCC827(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠樹突狀細胞低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP硅酮 OV-61Silicone OV-61
大鼠骨骼肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLM-肉湯shēng huà shì jì容量:500克
208F大鼠成纖維細胞 208F rat fibroblasts 大鼠成纖維細胞2′-脫氧胞苷-5′-... 2′-Deoxycytidine 5′-triphosphate dis... 102783-51-7 25MG 通用試劑
IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標簽)六二醇 Hqxcqthylqnq glycol 612-12-8
IAR20(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2 啤酒酵母液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)100克
肝動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)蛋白胨水培養(yǎng)基Peptone Water Medium
CD300C Others Human 人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸左西替利嗪Levoceitrizine HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12鹽酸西替利嗪(標準品)Cetirizine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
KIRREL3 Others Rat 大鼠 KIRREL3 / NEPH2 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸雷莫司瓊(標準品)Ramosetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
腸內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)*度酸(標準品)Etodolac質(zhì)量規(guī)格:含量測定
HCPEpiC細胞,人脈絡叢上皮細胞 小鼠瘤細胞,Nb2-11細胞 人前脂肪細胞-皮下cDNAHPA-s cDNA(標準品)Amfebutamone Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
支原體探針法熒光定量PCR試劑盒AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯(標準品)Benzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人骨骼肌成肌細胞總RNAHSkMM NA卡維?。藴势罚?/span>Cavidine質(zhì)量規(guī)格:含量測定
HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 5-羥色胺鹽酸鹽(標準品)Serotonin hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A月見草油(標準品)Evening primrose oil質(zhì)量規(guī)格:鑒別
NCI-H446[H446]細胞,小細胞細胞 人癌細胞系,ZR-75-30細胞 615小鼠T細胞性瘤株;L7712龍血素A(標準品)Loureirin A 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。