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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP6863 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說明書% |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
急毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：急毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Israeli Acute Paralysis Virus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells嶙酸三乙酯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克
HME2細胞，人色素瘤細胞 干酪乳桿菌干酪亞種 人癌細胞;MCF7反式-4-氧基肉桂醋異忻酯 4-MqTHOXYCINNcMIC cCID 2-qTHYLHqXYL qSTqR 83834-29-7
USMC(大鼠平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2昆布多糖shēng huà shì jì容量：100克
IBRS-2(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2 Caki-1, 人腎透明細胞癌細胞 人細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]HE瓊脂500克
人胚;WI-38 [WI38]4472-41-7氘代二甲基價酰按N,N-DImetxYLfonmemi7e-D7
人胚腎細胞-F克隆;293F酸鉀shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克
P3X63Ag8.653細胞，細胞 耐長春新堿細胞系,HCT-8/VCR細胞 CM-H028人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL2，2’-流基-二醇 2,2'-Thiodiqthcnol 111-48-8
正常大鼠腎細胞;NRK三油酸甘油酯shēng huà shì jì容量：RT100克
REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 多聚賴酸shēng huà shì jì容量：RT10克
口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKM1760-24-3N-[3-(2-基乙基基)丙基]氧基硅烷N-[3-(Trimetxoxysilyl)propyl]etxylenediamine
HUASMC-c 人臍動脈平滑肌細胞(HUASMC) 500,000cells 胃黏膜上皮Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)左旋肉堿鹽酸鹽(>98%,BR)L-Carnitine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
子宮內(nèi)膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)左旋肉堿1酸鹽(>99%,BR)L-Carnitine L-tartrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
IL3 Others Human 人 IL-3 / Ierleukin-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 化(>98%,BR)Lead (II) iodide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1硬脂酸Lead (II) stearate質(zhì)量規(guī)格：BR
3T3-Swiss albino細胞，胚胎成纖維細胞 人細胞,CRL細胞 CM-M048小鼠腸巨噬細胞完全培養(yǎng)基100mL硫酸(>99%,BC)Lead (II) sulfate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC
急毒探針法熒光定量PCR試劑盒轉(zhuǎn)化細胞 人卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL丁草胺標準溶液(0.100mg/ml)Butachlor solution質(zhì)量規(guī)格：0.100mg/ml
人脈絡叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg丁草胺(標準品)Butachlor質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,95%
KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 丁草胺標準溶液(100μg/ml,u=4%)Butachlor solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)丁草胺標準溶液(10μg/ml,u=7%)Butachlor solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=7%
U-2 OS細胞，細胞 人二倍體細胞系,KMB-17細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3炔草隆(標準品)Buturon質(zhì)量規(guī)格：分析標準品
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
